Zadatak 1 (nalazenje sekvence za konjsku gusteracnu ribonukleazu):
- kliknite na link "retrival of amionoacid sequences"
- upisite "horse pancreatic ribonuclease", kliknite na "submit" ili "search"
- kada dobijete rezultat pretrazivanja kliknite na link lijevo od identifikatora (RNAS1_HORSE)
- tu imamo razne informacije, ono sto nama treba je link na sredini stranice, "FASTA" format, kliknite na to
- sada imamo svoj proteinski niz zapisan na nacin koji je pogodan za rad, kopirajte ga u notepad ili neki drugi text editor (nemojte zaboraviti identifikator)
Zadatak 2 (nadjimo sve koji su slicni toj ribonukleazi)
- Izaberemo link "BLAST"
- izaberemo "protein blast" jer mi radiomo s proteinima
- kopiramo svoj niz iz notepada i zalijepimo ga u prvi prozor na vrhu oznacen s "enter FASTA sequence"
- pazimo da je dolje oznacen "protein to protein BLAST" i stisnemo tipku "BLAST"
- dobijemo puno proteina, uglavnom drugih gusteracnih ribonukleaza, koji su vise ili manje slicni nasem ulaznom i na vrhu sliku koja govori o slicnosti, ovdje su svi crveni, znaci visoko score, znaci jako slicni. Dolje mozemo vidjeti i poravnavanja.
Zadatak 3 (nadjimo jos 2 ribonukleaze za 4. zadatak)
- izaberite link "retrival of aminoacid sequences"
- upisite "red kangaroo", dobijete listu klokanovih proteina, nadjite "pancreatic ribonuclease", kliknite na njen identifikator (RNAS1_MACRU)
- kao u Zadatku 1 dodjite do koda u FASTA formatu i zalijepite ga u isti notepad gdje je konjska gusteracnaribonukleaza
- pod "retrival of aminoacid sequences" upisite "whale", nadjite pancreatic ribonuclease vrste mink whale (identifikator RNAS1_BALAC) i zalijepite kod u FASTA formatu u isti notepad prozor gdje su preostale dvije(Napomena: na ovoj pretrazi dobijemo previse rezultata da bi lako pronasli onaj koji nam treba. Iskoristimo cinjenicu da je pancreatic ribonuclease hidrolaza tj. upotrijebimo "Browse by enzyme class" i odaberemo Hydrolases-kliknite na (6).)
Zadatak 4 (tko je srodniji)
- odaberite link "CLUSTAL W"
- u vasem notepadu sa rezultatima Zadatka 3 napravite select all, kopirajte i nalijepite u prozor ClustalaW, pritisnite "submit"
- nakon cekanja (ponekad i poduljeg, ovisno o opterecenosti servera) doijemo rezultate: koliko su slicni jedan s drugim - vidi score, visestruko poravnavanje sva 3 niza i mogucnost da nacrta stablo (Show colors, Guide tree)
- u poravnavanju: * znaci konzervirane pozicije, dvotocka jako slicne aminokiseline,tocka donekle slicne.
- prikaz stabla: odaberite tab "Guide tree", kliknete na "show as phylogram tree"
Zadatak 5 (baza sa 3D prikazom strukture)-zahtjeva Javu i mozda dodatne plugine za browser
- odaberite link "RCSB Protein Data Bank"
- pod "Site Search" imati oznaceno "PDB ID or text" i utipkati identifikator "2eng", pritisnuti Search
- na desnoj strani ekrana u okviru koji sadrzi sliku odabrati "View in Jmol".
- pritiskom lijeve tipke misa i pomicanjem na slici mozemo rotirati prikaz molekule, a pritiskom na desnu tipku misa biramo dodatne funkcije